怎么看狗狗有没有抗体?
检测抗体一般采用检测血清中的抗体水平,也就是检测犬瘟热病毒、细小病毒的抗体的水平(目前比较常用)。 检测方法有酶联免疫吸附法(ELISA)和胶体金。这两种方法都很快速方便操作性很强而且价钱也很便宜,所以是现在宠物医院最常用的两种检测试剂的检验方法! 1.ELISA法的步骤如下:
①用洗涤液洗板次以上使反应产物完全脱落。
②向孔内加待检血清或抗体20微升/孔,同时设阳性和阴性对照各1孔和空白孔(不加待检血清或抗体,其余均同待检孔)。37℃孵育60分钟。
③每孔加HRP标记的二抗工作液10微升/孔,37℃孵育30分钟后洗板4次,每次10分钟。
④每孔加入底物A、B液各0.1毫升,混匀后在暗处显色5~15分钟。
⑤加入终止液(TMB),终止反应,于45²测定各孔OD值。计算结果。 (OD>0.2为阳性, OD<0.2为阴性)
2.胶体金的检测方法与ELISA的基本过程相同,不同的是将酶标二抗换成胶体金。
在临床实际工作中由于使用ELISA的方法测得的是狗狗体内的IgG抗体的含量,而这些抗体的产生要晚于其他抗体的产生时间,而细小病毒病以及犬瘟热的早期临床症状往往可以检测到IgM的升高,因此对于早期感染的情况ELISA的结果有可能出现假阴性的可能,而使用胶体金做快速检测就可以避免这种情况的发生;但是也有报道认为细小的抗体检测在后期会呈弱阳性,这时应该考虑有继发感染的的可能,所以在临床上应综合来判断病情。 至于测抗体的时间一般在发病前两周左右检测较为准确。如果抗体呈弱阳性的状态时,建议再加强打一次疫苗!